一、基本原理

二、兩種分選策略

1. 陽性分選（直接富集）

• 磁珠標(biāo)記目標(biāo)細(xì)胞 → 磁場(chǎng)吸附 → 洗脫得到高純度目的細(xì)胞

• 優(yōu)點(diǎn)：純度高、操作快

• 缺點(diǎn)：細(xì)胞表面帶有磁珠，可能影響后續(xù)部分實(shí)驗(yàn)

2. 陰性分選（間接富集）

• 磁珠標(biāo)記非目的細(xì)胞 → 磁場(chǎng)吸附雜質(zhì) → 流出液即為目標(biāo)細(xì)胞

• 優(yōu)點(diǎn)：終細(xì)胞無磁珠、無抗體，更適合培養(yǎng)、測(cè)序、移植等

• 缺點(diǎn)：純度略低于陽性分選

三、通用實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣本制備

   制備單細(xì)胞懸液（組織需充分消化、過濾、離心重懸），去除細(xì)胞團(tuán)塊與死細(xì)胞。
2. 封閉與抗體孵育

• 加入 Fc 受體阻斷劑，減少非特異性結(jié)合

• 加入免疫磁珠，4℃避光孵育 15–20 min

3. 磁場(chǎng)分選

• 將細(xì)胞懸液加入分選柱 / 分選管

• 置于磁力架上，靜置 3–5 min

• 棄去未結(jié)合的流出液（陰性分選則收集此液）

4. 洗脫收集

• 移開磁場(chǎng)，用緩沖液沖洗分選柱

• 收集洗脫液，即為高純度目標(biāo)細(xì)胞